人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达

姜曼; 黄钢; 黎万玲; 白云

doi:10.16016/j.1000-5404.2004.08.005

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人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达

更新时间：2026-01-09

- 人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达
- Journal of Army Medical University Vol. 26, Issue 8, (2004)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.08.005
  CLC： R346
- Online First：30 April 2004，
  
  Published：2004
- 稿件说明：
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姜曼,黄钢,黎万玲,白云,人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(08):0-.

姜曼, 黄钢, 黎万玲, et al. 人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(8).
姜曼,黄钢,黎万玲,白云,人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(08):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.08.005

姜曼, 黄钢, 黎万玲, et al. 人LIGHT基因的克隆及其在293T细胞中的表达[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(8). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.08.005.

摘要

目的　克隆人LIGHT分子的全长cDNA

构建重组真核表达质粒pCI neo LIGHT并在 2 93T细胞上获得稳定表达。方法　从人T细胞cDNA文库中用PCR技术克隆人LIGHT全长cDNA

装入T Easy载体

测序证实后

将LIGHTcDNA装入质粒pCI neo中构建真核表达载体。用电穿孔法转染 2 93T细胞

经G418筛选后

用流式细胞仪检测LIGHT分子的表达。结果　测序证实克隆的LIGHT全长cDNA阅读框正确完整

酶切证实LIGHT pCI neo中LIGHT插入方向正确。转染的2 93T细胞经G418筛选 3个月后

流式细胞仪检测有 78 69%的细胞表达人LIGHT分子。结论　成功克隆LIGHT基因并获得稳定表达膜型LIGHT分子的 2 93T细胞系。

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