人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化

曹廷兵; 叶治家; 彭家和; 巩燕; 黄刚

doi:10.16016/j.1000-5404.2004.01.021

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人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化

更新时间：2026-01-09

- 人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化
- Journal of Army Medical University Vol. 26, Issue 1, (2004)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.01.021
  CLC： R346
- Online First：15 January 2004，
  
  Published：2004
- 稿件说明：
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曹廷兵,叶治家,彭家和,巩燕,黄刚,人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(01):0-.

曹廷兵, 叶治家, 彭家和, et al. 人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(1).
曹廷兵,叶治家,彭家和,巩燕,黄刚,人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(01):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.01.021

曹廷兵, 叶治家, 彭家和, et al. 人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(1). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.01.021.

摘要

目的　克隆中国人的PPARγ2cDNA

并在大肠杆菌中进行表达纯化。方法　从正常人面部脂肪组织分离总RNA

采用RT PCR及序列测定等方法获得人的PPARγ2cDNA

然后克隆至原核表达载体pET2 8a

转化至大肠杆菌BL2 1(DE3 )

IPTG进行诱导表达 ;在N末端融合了 6×His纯化标签的表达产物进行Westernblot分析和用Ni2 + NTA离子交换树脂进行纯化 ;纯化蛋白进行SDS PAGE纯度分析。结果　获得了正常中国人的PPARγ2cDNA

并成功构建了高效原核表达质粒pET2 8a PPARγ2 ;Westernblot结果表明

经IPTG诱导

在大肠杆菌中表达了分子量为 5 6× 10 3 的PPARγ2目的蛋白 ;表达产物经Ni2 + NTA离子交换树脂纯化

PPARγ2蛋白的纯度大于 90 %以上。结论　克隆得到正常中国人PPARγ2cDNA的序列与Genebank报道的序列一致

并且在E .coli中成功表达和纯化了PPARγ2蛋白。此研究为后续PPARγ2功能活性和配体的筛选实验奠定了基础

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