超抗原SED突变体的构建表达和鉴定

李亚斐; 朱锡华; 黄云辉; 杨劲

doi:10.16016/j.1000-5404.2004.01.018

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超抗原SED突变体的构建表达和鉴定

更新时间：2026-01-09

- 超抗原SED突变体的构建表达和鉴定
- Journal of Army Medical University Vol. 26, Issue 1, (2004)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.01.018
  CLC： R392
- Online First：15 January 2004，
  
  Published：2004
- 稿件说明：
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李亚斐,朱锡华,黄云辉,杨劲,超抗原SED突变体的构建表达和鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(01):0-.

李亚斐, 朱锡华, 黄云辉, et al. 超抗原SED突变体的构建表达和鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(1).
李亚斐,朱锡华,黄云辉,杨劲,超抗原SED突变体的构建表达和鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(01):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.01.018

李亚斐, 朱锡华, 黄云辉, et al. 超抗原SED突变体的构建表达和鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(1). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.01.018.

摘要

目的　在预测的SED免疫识别活性位点处引入定点突变

构建SED突变体。方法　分别设计侧翼引物和突变引物

用megaprimerPCR方法引入突变碱基

将PCR产物与pTrcHis B质粒连接

转化E .coliDH5α

用IPTG进行诱导表达

金属螯合亲和层析法纯化

免疫印迹检测纯化的蛋白。结果　测序结果表明在相应的位置引入了正确突变

SDS PAGE和免疫印迹检测结果证实了目的蛋白的表达

将构建成功的突变体分别命名为SEDN2 3A、SEDN2 3A/H2 6R、SEDF45A、SEDL5 9A、SEDN61A、SEDI92A和SEDF2 0 3A。结论　成功构建了一系列SED突变体

为后续的免疫识别研究奠定了基础

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