大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建

王锋超; 高京生; 粟永萍; 徐辉; 王军平; 艾国平; 苑晓燕; 楼淑芬; 刘晓宏; 章波; 黄跃生; 蒋建新

doi:10.16016/j.1000-5404.2004.01.005

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大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建

更新时间：2026-01-09

- 大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建
- Journal of Army Medical University Vol. 26, Issue 1, (2004)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.01.005
  CLC： Q78
- Online First：15 January 2004，
  
  Published：2004
- 稿件说明：
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王锋超,高京生,粟永萍,徐辉,王军平,艾国平,苑晓燕,楼淑芬,刘晓宏,章波,黄跃生,蒋建新,大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(01):0-.

王锋超, 高京生, 粟永萍, et al. 大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(1).
王锋超,高京生,粟永萍,徐辉,王军平,艾国平,苑晓燕,楼淑芬,刘晓宏,章波,黄跃生,蒋建新,大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(01):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.01.005

王锋超, 高京生, 粟永萍, et al. 大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(1). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.01.005.

摘要

目的　克隆和鉴定大剂量辐射前后大鼠空肠上皮细胞IEC 6差异表达基因

为探索肠上皮细胞辐射损伤修复的分子机制提供线索。方法　IEC 6细胞经 3 5Gyγ射线照射后由抑制性消减杂交 (SSH)方法和T/A克隆技术进行差异表达基因消减cDNA文库的构建

用反向Northern杂交法对库中的EST序列进行筛选

挑取阳性克隆测序

和GenBank比对后挑选有限克隆进行正向Northern杂交进行验证。结果　扩增消减杂交cDNA文库得到约 2 0 0 0个克隆

随机选取 96个白色克隆进行PCR扩增

用反向Northern杂交法对库中的EST片段进行筛选得到 15个阳性克隆

代表 12个基因的转录产物

部分基因功能已经明确

涉及细胞骨架、细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面

另外还获得一新的cDNA序列。结论　SSH法建立了IEC 6细胞差异表达基因消减cDNA文库

一次获得多条差异显示EST片段

基因种类涉及细胞骨架

细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面

这些基因可能在肠上皮细胞的辐射损伤反应中起重要作用

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