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Online First:30 August 2003,
Published:2003
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朱永红,邹全明,非融合型重组人白细胞介素-18的纯化及鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2003,25(16):0-.
朱永红, 邹全明. 非融合型重组人白细胞介素-18的纯化及鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2003, 25(16).
朱永红,邹全明,非融合型重组人白细胞介素-18的纯化及鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2003,25(16):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2003.16.009
朱永红, 邹全明. 非融合型重组人白细胞介素-18的纯化及鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2003, 25(16). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2003.16.009.
目的 获得高纯度的重组人白细胞介素 18(rhIL 18)。方法 采用溶菌酶加超声破菌的方法抽提包涵体
以8mol/L尿素溶解包涵体
变性条件下以阴离子柱层析进行首步纯化
复性后再进行凝胶过滤层析。对纯化的样品进行了SDS PAGE、HPLC、N端氨基酸序列、免疫印迹及生物学活性分析。结果 rhIL 18在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在
所提取的包涵体中重组蛋白纯度可达到 80 %以上
包涵体经二步柱层析纯化后
HPLC分析纯度达 98%以上
SDS PAGE测定其分子质量约 19× 10 3
N端 15个氨基酸序列与预期一致
生物学活性分析证实纯化的rhIL 18具有诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生IFN γ的能力。结论 所建立的纯化rhIL 18的方法简便有效
为开展rhIL 18的结构活性关系研究及其大规模纯化打下了良好的基础。
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