目的　对丙型肝炎病毒 (HepatitisCvirus

HCV) 5′ 非编码区 ( 5′ Noncodingregion

5′ NCR)靶向性脱氧核酶 (De oxyribozymes

DRz)在靶基因调控性荧光素酶表达HepG2细胞中的活性进行评价。方法　根据HCV 5′ NCR中符合 5′…Y↓R… 3′(Y =A/G

R =U/C)特征的位点及 5′ NCR的二级结构选择靶位

采用 10 2 3DRz基序

设计并合成HCV靶向性脱氧核酶DRz 2 3 2、DRz 12 7、DRz 84、DRz1以及两端被硫代修饰的DRz(Phosphorothioatedeoxyribozymes

TDRz)和活性中心区人工突变的硫代DRz(MutantphosphorothioateDRz

MDRz)。直接将其加入体外培养的受HCV 5′ NCR调控的表达荧光素酶HepG2细胞 (HepG2 970 6细胞株 )中

或用脂质体转染法将其导入靶细胞。用化学发光法检测荧光素酶活性

计算抑制率。结果　转染终浓度为 0 5 μmol/L的药物 2 4h后

DRz 2 3 2 /TDRz 2 3 2、DRz 12 7/TDRz 12 7、DRz 84/TDRz 84和DRz1/TDRz1的抑制率分别约14 3 %/ 14 9%、5 3 2 %/ 5 0 6%、2 5 6%/ 2 3 8%和 44 7%/ 43 3 %

均高于对应的MRz

其中DRz 12 7/TDRz 12 7与MRz 12 7( 4 1 2 %)相比抑制率有显著性差别 (P 0 0 5 )。直接将TDRz 12 7或MRz 12 7加入细胞培养体系中被动作用 5h和 2 4h

抑制率无明显差别

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