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Online First:30 June 2002,
Published:2002
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曾仲,韩本立,反义TIMP1基因转染Ito细胞后对其ECM代谢的影响[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(06):0-.
曾仲, 韩本立. 反义TIMP1基因转染Ito细胞后对其ECM代谢的影响[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(6).
曾仲,韩本立,反义TIMP1基因转染Ito细胞后对其ECM代谢的影响[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(06):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2002.06.034
曾仲, 韩本立. 反义TIMP1基因转染Ito细胞后对其ECM代谢的影响[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(6). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2002.06.034.
目的 探讨反义TIMP1基因对Ito细胞 (贮脂细胞 )金属蛋白酶的表达和细胞外基质 (ECM )降解的影响。方法 将大鼠全长TIMP1cDNA反向插入哺乳表达载体pCI neo中
构建反义TIMP1基因真核表达载体
用脂质体介导的方法
将反义TIMP1基因导入Ito细胞株CFSC 2G中
选择稳定转染的Ito细胞株培养
采用RT PCR、原位杂交、免疫组化及RIA等方法
观察TIMP1mRNA和蛋白、MMP1mRNA和蛋白、α1(Ⅲ )mRNA、FN蛋白表达及细胞培养上清中PCI、PCⅢ、HA、LN水平的变化。结果 反义TIMP1基因能明显地抑制Ito细胞中TIMP1mRNA和蛋白的高表达 (P 0 0 1)。转基因细胞中α1(Ⅲ )mRNA、MMP1mRNA、FN蛋白的表达与未转基因细胞比较无明显变化 (P 0 0 5 )。转基因后Ito细胞培养上清中PCI、PCⅢ、HA、LN水平明显低于未转基因细胞 (P 0 0 1)。结论 反义TIMP1基因可以抑制贮脂细胞内源性TIMP1产生
但未影响MMP1的表达
从而促进了细胞外基质的降解
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