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Online First:30 June 2002,
Published:2002
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胡川闽,粟永萍,程天民,王军平,刘贤华,王晓东,冉新泽,小鼠轻型肠型放射病肠上皮细胞差异表达基因的筛选研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(06):0-.
胡川闽, 粟永萍, 程天民, et al. 小鼠轻型肠型放射病肠上皮细胞差异表达基因的筛选研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(6).
胡川闽,粟永萍,程天民,王军平,刘贤华,王晓东,冉新泽,小鼠轻型肠型放射病肠上皮细胞差异表达基因的筛选研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(06):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2002.06.033
胡川闽, 粟永萍, 程天民, et al. 小鼠轻型肠型放射病肠上皮细胞差异表达基因的筛选研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(6). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2002.06.033.
目的 筛选经辐射诱导后小鼠肠上皮细胞的差异或特异表达基因。方法 通过基因库检索和计算机分析
设计出较通用的 5’端武断引物在基因库中其呈现几率要高出数倍到数十倍的 4条 5′端高同源mRNA差示引物
应用DDRT PCR
测序凝胶电泳
放射自显影
分子杂交等方法
分析并筛选小鼠受 12Gyγ射线全身照射后 3h(R1组 )和 96h(R2组 )肠上皮细胞差异或特异表达基因。结果 5′端高同源性引物mRNA差异结果显示
与正常比较
小鼠全身 12Gy照射后不同时相的肠上皮细胞基因表达存在差异
从近 80 0 0条PCR扩增产物中
比较筛选出 12个差异表达基因片段。RNA blot杂交对 11个辐射损伤情况下差异表达基因片段进行了鉴定。R1S1和R1S2差异基因片段在辐射损伤后 3h的肠上皮细胞中呈特异性表达 ;R2S2和R2S5基因片段在辐射损伤后 96h的肠上皮细胞中呈特异性表达 ;R2S1、R2S6和R2S8基因片段是假阳性差异表达基因片段 ;而R2S1、R2S4及R2S8用RNA blot法检测不到表达。序列分析结果显示R1S1和R2S2在基因库中未见高同源的基因序列
与R1S1同源性最高 (60 0 0 % )的是一个源于大鼠输卵管特异性糖蛋白基因
R2S5与一种小鼠肌细胞钙离子信号传导分子有 67 2 1%的同源性 ;R2S2高度同源于鼠源性肿瘤诱导蛋白p3 2 (91 5 2 % )
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