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Online First:30 January 2000,
Published:2000
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李勇,韩本立,王会信,龙建银,李昆,基因转移人TGF-β1在NIH/3T3细胞中表达鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2000,22(01):0-.
李勇, 韩本立, 王会信, et al. 基因转移人TGF-β1在NIH/3T3细胞中表达鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2000, 22(1).
李勇,韩本立,王会信,龙建银,李昆,基因转移人TGF-β1在NIH/3T3细胞中表达鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2000,22(01):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2000.01.029
李勇, 韩本立, 王会信, et al. 基因转移人TGF-β1在NIH/3T3细胞中表达鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2000, 22(1). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2000.01.029.
目的 :基因转移人转化生长因子β1(TGF β1)在真核细胞系中蛋白表达。方法 :借助真核质粒表达载体
将人TGF β1 转移入小鼠成纤维细胞株(NIH/3T3)细胞中
经G418筛选
克隆扩增
Southernblot、Northernblot、PCR、RT PCR鉴定
并经水貂肺上皮细胞(CCL 64)生长抑制法
对克隆细胞分泌TGF β1 蛋白进行活性检测。结果 :证实了重组人TGF β1 基因在NIH/3T3细胞基因组中的稳定重组和mRNA水平的表达
TGF β1 蛋白活性检测及流式细胞仪免疫荧光测定结果
均证实了克隆细胞表达并分泌TGF β1 蛋白。结论 :通过基因转移方法成功地在NIH/3T3细胞中重组并表达人TGF β1 蛋白
PCR结果还提示NIH/3T3细胞系基因组中无人TGF β1 序列存在。
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