绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化

刘启富; 汪正清; 张克斌; 胡晓梅; 周善章

doi:10.16016/j.1000-5404.1998.02.037

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绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化

更新时间：2026-01-09

- 绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化
- Journal of Army Medical University Vol. 20, Issue 2, (1998)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.1998.02.037
  CLC： R378.991
- Online First：30 April 1998，
  
  Published：1998
- 稿件说明：
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刘启富,汪正清,张克斌,胡晓梅,周善章,绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),1998,20(02):0-.

刘启富, 汪正清, 张克斌, et al. 绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化[J]. Journal of Army Medical University, 1998, 20(2).
刘启富,汪正清,张克斌,胡晓梅,周善章,绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),1998,20(02):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.1998.02.037

刘启富, 汪正清, 张克斌, et al. 绿脓杆菌外毒素A抗原的制备与纯化[J]. Journal of Army Medical University, 1998, 20(2). DOI： 10.16016/j.1000-5404.1998.02.037.

摘要

目的：制备绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）抗原。方法：用胰酶酪蛋白大豆肉汤（Ｔｒｙｐｔｉｃｓｏｙｂｒｏｔｈ，ＴＳＢ），于３２℃水浴１２０次／ｍｉｎ振荡培养绿脓杆菌ＰＡ１０３株，其培养物经７０００ｒ／ｍｉｎ离心，取上清用７０％饱和硫酸铵沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析，ＤＥＡＥ－５２（ＤＥ－５２）柱层析，羟基磷灰石柱层析制备ＰＥＡ。结果：纯化的ＰＥＡ经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）为一条带，分子量为Ｍｒ（６６～６８）×１０３ｕ。环状沉淀试验，琼脂双向扩散试验，酶联免疫吸附试验和免疫印迹分析表明本室纯化的ＰＥＡ，抗原性和分子量均与文献报道一致。结论：用本方法制备ＰＥＡ，避免了对ＤＥ－５２的反复再生，缩短了实验流程，对保持ＰＥＡ的生物活性有利。

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