Intratumoral
Gemella haemolysans promotes neoadjuvant chemoimmunotherapy efficacy in esophageal squamous cell carcinoma-bearing mice- Journal of Chongqing Medical University Vol. 50, Issue 10, Pages: 1345-1352(2025)
- 作者机构：
1.重庆医科大学附属第一医院胸心外科，重庆 400016
2.重庆医科大学药学院遗传药理学与药物基因组学实验室，重庆 400016
- 作者简介：
- 基金信息：
DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003919
CLC： R655.4Received：11 April 2025，
Revised：2025-05-17，
Accepted：21 June 2025，
Published：28 October 2025
- 稿件说明：
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宋清华,卢睿瑾,黄羽棠,等.瘤内Gemella haemolysans对增强食管鳞状细胞癌荷瘤小鼠新辅助化学免疫治疗疗效的研究[J].重庆医科大学学报,2025,50(10):1345-1352.
Song Qinghua,Lu Ruijin,Huang Yutang,et al.Intratumoral Gemella haemolysans promotes neoadjuvant chemoimmunotherapy efficacy in esophageal squamous cell carcinoma-bearing mice[J].Journal of Chongqing Medical University,2025,50(10):1345-1352.
宋清华,卢睿瑾,黄羽棠,等.瘤内Gemella haemolysans对增强食管鳞状细胞癌荷瘤小鼠新辅助化学免疫治疗疗效的研究[J].重庆医科大学学报,2025,50(10):1345-1352. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003919.
Song Qinghua,Lu Ruijin,Huang Yutang,et al.Intratumoral Gemella haemolysans promotes neoadjuvant chemoimmunotherapy efficacy in esophageal squamous cell carcinoma-bearing mice[J].Journal of Chongqing Medical University,2025,50(10):1345-1352. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003919.
摘要
目的
2
探讨瘤内溶血孪生球菌（
Gemella haemolysans
，
G.haemolysans
）能否增强食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）荷瘤小鼠新辅助化学免疫治疗（Neoadjuvant chemoimmunotherapy，NACI）疗效及可能的作用机制。
方法
2
随机将25只4周龄的C57BL/6雌鼠分为5组，每组5只，分别为
阴性对照组（NC组）、化疗组、
G.haemolysans
-化疗组、免疫治疗组、
G.haemolysans
-免疫治疗组。每组小鼠予以复合抗生素（Antibiotic Cocktail，ATBx）统一处理2周，构建无菌小鼠模型。第0天，通过皮下接种小鼠食管癌细胞株AKR及
G.haemolysans
-AKR细胞，构建ESCC荷瘤小鼠模型。第7天小鼠皮下成瘤后，每周3次腹腔注射药物，第28天治疗结束后，对小鼠实施安乐死，离体肿瘤组织经4%多聚甲醛固定后进行荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH），定量分析肿瘤组织内
G.haemolysans
的定位与表达差异；同时进行多重荧光免疫组化技术（multiplex immunohistochemical，mIHC）及流式细胞术（flow cytometer，FCM）系统性分析免疫治疗组小鼠肿瘤免疫微环境（tumor immune mircroenvironment，TIME）中免疫细胞的数量。
结果
2
G.haemolysans
可以明显促进NACI治疗ESCC的效果（
P
<
0.05），
G.haemolysans
对荷瘤小鼠的化疗方案没有作用，但对NACI治疗方案有明显的增强作用（
P
<
0.05），且明显促进了TIME中自然杀伤细胞（natural killer，NK）的浸润（
P
<
0.01）。
结论
2
G.haemolysans
通过增加TIME中NK细胞的浸润来提高NACI治疗ESCC荷瘤小鼠的效果。
Abstract
Objective
2
To investigate whether intratumoral
Gemella haemolysans
（
G.haemolysans
） enhances the efficacy of neoadjuvant chemoimmunotherapy（NACI） in esophageal squamous cell carcinoma（ESCC）-bearing mice and the underlying mechanism.
Methods
2
Twenty-five 4-week-old female
C57BL/6
mice were randomized into five groups（
n
=5 per group）：negative control（NC） group，chemotherapy group，
G.haemolysans
+ chemotherapy group，NACI group，and
G.haemolysans
+ NACI group. A germ-free mouse model was established in each group by administering antibiotic cocktail for 2 weeks. On day 0，ESCC-bearing mouse models were built through subcutaneous inoculation of either murine esophageal cancer cell line AKR or
G.haemolysans
-AKR cells. On day 7 when tumors formed under the skin，drugs were injected into the abdomen thrice weekly. On day 28 when the treatments were finished，the mice were sacrificed to harvest their tumors，and th
en the tumors were fixed in 4% paraformaldehyde. We located and quantified
G.haemolysans
within the tumors through fluorescence in situ hybridization，and characterized immune cell composition in the tumor immune microenvironment（TIME） of the mice treated with NACI through multiplex immunohistochemistry and flow cytometry.
Results
2
G.haemolysans
significantly strengthened the efficacy of NACI in ESCC（
P
<
0.05），whereas no chemosensitizing effects were observed on chemotherapy in ESCC-bearing mice.
G.haemolysans
significantly enhanced natural killer（NK） cell infiltration within the TIME（
P
<
0.01）.
Conclusion
2
G.haemolysans
improves NACI efficacy in ESCC-bearing mice by increasing NK cell recruitment in the TIME.
关键词
Keywords
references
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