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1. 四川省泸州医学院附属医院骨科
2. 成都军区昆明总医院骨科
Published:2007,
Published Online:15 February 2007,
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[J]. Journal of army medical university, 2007, 29(3): 270-272.
DOI:
[J]. Journal of army medical university, 2007, 29(3): 270-272. DOI:
目的 分离培养人胚神经干细胞(human neural stem cells
hNSCs),建立人胚神经干细胞株;体外通过逆转录病毒转染人胚神经干细胞,观察其生物学特性及在脊髓损伤(spinal cord Injury
SCI)模型体内的表达。 方法 分离孕10~20周(平均13周)人胚脑皮层来源的神经干细胞并连续传代培养,通过克隆试验、免疫组织化学等方法检测其生长特性与增殖能力;用构建了增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein
EGFP)基因的逆转录病毒转染神经干细胞并检测其生物学特性;制备兔T
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全横断脊髓损伤模型,观察携带EGFP基因的人胚神经干细胞在体内的表达情况。 结果 从胎龄10~20周的人胚脑皮层中成功分离出人胚神经干细胞,该细胞具有连续克隆能力及多分化潜能,能表达干细胞及分化细胞的特异性抗原;逆转录病毒转染后,仍然保持未分化状态并能自我更新形成新的神经球;移植入兔脊髓损伤模型后,可在体内存活较长时间,高效表达转基因蛋白。 结论 人胚脑皮层中存在能连续传代培养的神经干细胞,转基因及移植入体内后能高效表达目的基因蛋白并保留干细胞的基本属性,发挥治疗作用。
神经干细胞人胚胎转染移植
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