OBJECTIVE： To establish a method for simultaneous determination of gamabufotalin， arenobufagin， telocinobufagin， desacetylcinobufotalin， bufotalin， cinobufotalin， bufalin， cinobufagin and resibufogenin in Liushen pills. METHODS： HPLC method was adopted. The determination was performed on ODS-2 C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.15％ phosphoric acid （gradient elution） at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 296 nm， and column temperature was 40 ℃. The sample size was 10 μL. RESULTS： The linear ranges of gamabufotalin， arenobufagin， telocinobufagin， desacetylcinobufotalin， bufotalin， cinobufotalin，bufalin， cinobufagin and resibufogenin were 1.10-70.39 μg/mL（r＝0.999 6）， 4.03-257.78 μg/mL（r＝0.999 9），4.09-261.89 μg/mL（r＝0.999 9），0.67-42.96 μg/mL（r＝0.999 9），3.36-214.73 μg/mL（r＝0.999 9）， 5.73-366.44 μg/mL （r＝0.999 9）， 3.77-241.56 μg/mL （r＝0.999 9），7.31-468.11 μg/mL （r＝0.999 9），5.18-331.56 μg/mL（r＝0.999 9）. The limits of quantitation were 1.10， 0.85， 1.02， 0.34， 0.84， 1.43， 0.94， 3.66， 2.59 μg/mL； the limits of detection were 0.27， 0.21， 0.51， 0.17， 0.42， 0.72， 0.47， 0.91， 1.30 μg/mL， respectively. RSDs of precision， stability and reproducibility tests were all lower than 3.0％. The recoveries were 96.35％-103.10％（RSD＝2.72％，n＝6）， 96.76％-103.24％（RSD＝2.49％，n＝6）， 97.01％-101.39％（RSD＝1.64％，n＝6）， 97.32％-104.01％（RSD＝2.61％，n＝6）， 95.76％-103.60％（RSD＝2.92％，n＝6）， 95.07％-102.59％（RSD＝2.92％，n＝6）， 95.77％-101.43％（RSD＝2.03％，n＝6）， 95.11％-103.72％（RSD＝3.19％，n＝6）， 95.23％-103.34％（RSD＝3.24％，n＝6）， respectively. CONCLUSIONS： The method is simple， rapid， accurate， reliable and can be used for the determination of bufadienolide in Liushen pills .