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Published:2014
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郭仲莉,曾照芳,鲁卫平.利用超分支滚环扩增技术检测miR-21[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2014,36(18):1963-1965.
郭仲莉, 曾照芳, 鲁卫平. 利用超分支滚环扩增技术检测miR-21[J]. Journal of Army Medical University, 2014, 36(18): 1963-1965.
郭仲莉,曾照芳,鲁卫平.利用超分支滚环扩增技术检测miR-21[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2014,36(18):1963-1965. DOI:
郭仲莉, 曾照芳, 鲁卫平. 利用超分支滚环扩增技术检测miR-21[J]. Journal of Army Medical University, 2014, 36(18): 1963-1965. DOI:
目的 利用超分支滚环扩增(hyper-rolling cycle amplification,HRCA)技术建立一种检测microRNA的方法。 方法 以miR-21为研究对象,设计特异的逆转录引物及锁式探针。通过对不同浓度的模板及不同的microRNA进行检测来研究本方法的灵敏度和特异性。 结果 通过对反应条件进行优化,100 nmol/L的锁式探针在Taq DNA连接酶作用下46 ℃连接30 min,Bst DNA聚合酶作用下60 ℃反应50 min,可实现靶序列最大效率的扩增。该方法特异性好,最低检测浓度为10 pmol/L。 结论 HRCA技术灵敏度高、特异性好,无需特殊昂贵的仪器,且简单易操作,能够应用于microRNA检测。
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