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Published:2011
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李文静,张磊,赖娅娜,唐金海,钟山亮,恽文,赵建华.人乳腺癌多西紫杉醇耐药细胞株的建立及特性[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2011,33(21):2297-2299.
李文静, 张磊, 赖娅娜, et al. 人乳腺癌多西紫杉醇耐药细胞株的建立及特性[J]. Journal of Army Medical University, 2011, 33(21): 2297-2299.
李文静,张磊,赖娅娜,唐金海,钟山亮,恽文,赵建华.人乳腺癌多西紫杉醇耐药细胞株的建立及特性[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2011,33(21):2297-2299. DOI:
李文静, 张磊, 赖娅娜, et al. 人乳腺癌多西紫杉醇耐药细胞株的建立及特性[J]. Journal of Army Medical University, 2011, 33(21): 2297-2299. DOI:
目的 建立人乳腺癌多西紫杉醇(Docetaxel,Doc)耐药细胞模型MCF-7/Doc,初步探讨其生物学特性。 方法 采用Doc低浓度逐步加量诱导法建立MCF-7/Doc耐药株;通过细胞形态学观察、生长曲线和群体倍增时间测定、MTT法药物敏感试验及流式细胞术评价其生物学特性;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测多药耐药基因MDR1 mRNA 和蛋白的表达。 结果 经10个月的诱导成功建立MCF-7/Doc细胞株,可在100 ng/ml Doc培养液中稳定生长,耐药指数为亲代敏感细胞MCF-7/S的33.3倍,对其他多种化疗药物呈交叉耐药状态。光镜下,药物处理后细胞变圆变小、核分裂象减少;MCF-7/Doc倍增时间较MCF-7/S延长[(41.6±1.6) h vs (30.6±1.1) h;P0.01
]
。与亲代相比,耐药细胞处于G
1
期和G
2
期的细胞增加、S期减少;MDR1基因表达水平增高90.7倍,蛋白表达转为阳性,而雌激素受体阳性表达丢失。 结论 MCF-7/Doc细胞具有典型的多药耐药性,MDR1基因和蛋白过表达是其获得性耐药的主要机制之一。
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