浏览全部资源
扫码关注微信
Published:2010
移动端阅览
秦烨,韩钰,任玉珊,王艳林.细胞膜上稳定表达融合蛋白CRT/vGPCR A549细胞株的建立[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(15):1684-1686.
秦烨, 韩钰, 任玉珊, et al. 细胞膜上稳定表达融合蛋白CRT/vGPCR A549细胞株的建立[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(15): 1684-1686.
秦烨,韩钰,任玉珊,王艳林.细胞膜上稳定表达融合蛋白CRT/vGPCR A549细胞株的建立[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(15):1684-1686. DOI:
秦烨, 韩钰, 任玉珊, et al. 细胞膜上稳定表达融合蛋白CRT/vGPCR A549细胞株的建立[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(15): 1684-1686. DOI:
目的 将人钙网蛋白(calreticulin,CRT)基因与病毒G蛋白偶联受体(virus G-protein couple receptor,vGPCR)基因进行基因重组,用此重组基因建立细胞膜上稳定高表达CRT/vGPCR融合蛋白的人肺癌A549细胞株。 方法 从pSG5-vGPCR质粒中获得全长vGPCR基因片段并与CRT全长编码序列的3′端连接形成融合基因,然后将融合基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。用此质粒转染人A549肺癌细胞,通过G418筛选建立稳定转染的A549细胞株,用RT-PCR检测重组融合基因的表达,用细胞免疫荧光分析鉴定融合蛋白的表达及其在细胞膜上的定位。 结果 成功获得重组融合质粒pcDNA3.1(+)-CRT/vGPCR,经DNA序列测定证实融合基因两阅读框(ORF)对接无误。将上述质粒转染A549细胞后,建立了稳定转染CRT/vGPCR的A549细胞株,融合基因在A549细胞中表达并定位到细胞膜上。 结论 通过与CRT基因融合重组,具有膜定位能力的vGPCR能将CRT蛋白高效包被到肿瘤细胞膜上。
0
Views
下载量
CSCD
Publicity Resources
Related Articles
Related Author
Related Institution