人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备

李朴; 孔飞飞; 余雪梅; 成凤; 涂植光

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人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备

更新时间：2026-01-09

- 人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备
- Journal of Army Medical University Vol. 32, Issue 14, Pages: 1579-1581(2010)
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  CLC： R392-33;R392.11
- Published：2010
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李朴,孔飞飞,余雪梅,成凤,涂植光.人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(14):1579-1581.

李朴, 孔飞飞, 余雪梅, et al. 人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(14): 1579-1581.
李朴,孔飞飞,余雪梅,成凤,涂植光.人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(14):1579-1581. DOI：

李朴, 孔飞飞, 余雪梅, et al. 人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(14): 1579-1581. DOI：

摘要

目的构建YB-1原核表达系统，诱导表达后纯化YB1融合蛋白并制备其多抗。方法采用RT-PCR扩增YB-1编码序列，将该序列克隆至载体pET-32a(+)；转化BL21(DE3)，确定最佳表达条件；采用亲和层析与超滤纯化目的蛋白，经Western blot鉴定后免疫家兔，制备其抗体。结果成功扩增YB-1编码序列并构建了其表达载体；SDS-PAGE结果显示，表达条件经优化后（28 ℃

5 h

0.5 mmol/L IPTG），YB-1融合蛋白在BL21中得到高效可溶性表达；Western blot结果证实，表达产物经纯化后获得了纯度较高的YB-1融合蛋白，将该蛋白免疫家兔后获得了效价与特异性较高的抗体。结论成功建立了YB-1蛋白的原核表达系统及蛋白纯化方法，并制备了其抗体。

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