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Published:2010
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丁可军,何志旭,舒莉萍,许威,姬牧远,杨小燕.pCS2+-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(10):1119-1120.
丁可军, 何志旭, 舒莉萍, et al. pCS2+-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(10): 1119-1120.
丁可军,何志旭,舒莉萍,许威,姬牧远,杨小燕.pCS2+-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(10):1119-1120. DOI:
丁可军, 何志旭, 舒莉萍, et al. pCS2+-FLASH重组质粒的构建及斑马鱼FLASH基因反义mRNA探针的制备[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(10): 1119-1120. DOI:
目的 构建斑马鱼pCS
2+
-FLASH重组质粒,制备斑马鱼FLASH 反义mRNA探针。 方法 提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼FLASH基因片段,将得到的FLASH片段和pCS
质粒用BamHⅠ及HindⅢ双酶切后插入pCS
质粒,通过对重组质粒进行双酶切及插入片段序列测序鉴定后,经T
3
RNA体外转录体系合成DIG-FLASH基因反义mRNA探针。 结果 RT-PCR法扩增出长度为533 bp的特异性产物,构建的pCS
-FLASH重组质粒经酶切鉴定和测序结果与预期相符;用FLASH反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观察到FLASH在野生型斑马鱼神经系统中存在表达。 结论 成功构建了pCS
-FLASH重组质粒及FLASH基因反义mRNA探针。
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