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Published:2007
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袁拥华,杨晓兰,李伟,李龙江,汤为学,余瑜.人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2007,29(23):2292-2293.
袁拥华, 杨晓兰, 李伟, et al. 人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立[J]. Journal of Army Medical University, 2007, 29(23): 2292-2293.
袁拥华,杨晓兰,李伟,李龙江,汤为学,余瑜.人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2007,29(23):2292-2293. DOI:
袁拥华, 杨晓兰, 李伟, et al. 人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立[J]. Journal of Army Medical University, 2007, 29(23): 2292-2293. DOI:
目的 优化人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质样品制备方法,建立其亚细胞蛋白质组双向电泳技术。 方法 分步提取人肝癌细胞株QGY-7701细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,采用不同的方法除盐、浓缩样品,然后分别采用2种不同的水化上样缓冲液重悬样品,进行双向凝胶电泳。 结果 使用三氯乙酸/丙酮的除盐效果好,样品损失少;采用上样缓冲液(7 mol/L尿素+2 mol/L硫脲+4%CHAPS+40 mmol/L Tris+65 mmol/L DTT+2%两性电解质)有利于蛋白的溶解,获得更多的蛋白信息,检出的细胞质蛋白点数可达(995±53),细胞膜蛋白点数可达(1 035±58),细胞核蛋白点数可达(893±45)。 结论 获得了清晰的人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳图谱。
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