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Published:2006
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郭旭,张竞,李玉珍,张麒,李东云.SARS冠状病毒N蛋白在酵母中的表达纯化及抗原性分析[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2006,28(01):59-62.
郭旭, 张竞, 李玉珍, et al. SARS冠状病毒N蛋白在酵母中的表达纯化及抗原性分析[J]. Journal of Army Medical University, 2006, 28(1): 59-62.
郭旭,张竞,李玉珍,张麒,李东云.SARS冠状病毒N蛋白在酵母中的表达纯化及抗原性分析[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2006,28(01):59-62. DOI:
郭旭, 张竞, 李玉珍, et al. SARS冠状病毒N蛋白在酵母中的表达纯化及抗原性分析[J]. Journal of Army Medical University, 2006, 28(1): 59-62. DOI:
目的 研究人SARS冠状病毒核壳N蛋白在Pichia pastoris酵母中的表达,获得具有生物学活性的重组N蛋白,并鉴定表达蛋白的抗原性,为下一步的研究奠定基础。方法 合成引物扩增SARS冠状病毒N基因,插入含AOX1启动子的Pichia pastoris酵母表达载体中,转化酵母宿主菌KM71H、X-33、GS115,筛选阳性转化子,摇瓶培养,用甲醇诱导表达。表达产物经镍离子柱亲和层析纯化后,以抗SARS冠状病毒N蛋白的小鼠单抗、兔多抗及SRAS病人阳性血清鉴定其抗原性。结果 SDS-PAGE和免疫学分析显示,酵母转化子仅在KM71H、X-33中有Mr约70 000的诱导蛋白,表达产物具有良好的抗原性和特异性。结论 在酵母表达系统中,初步实现了SARS冠状病毒核壳N蛋白的有效表达。
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